Detección molecular de Tomato fruit blotch virus
LoopSense™ Q ToFBV es un kit molecular diseñado para la detección cualitativa de Tomato fruit blotch virus, identificado habitualmente mediante las abreviaturas ToFBV y ToBFV.
El ensayo utiliza RT-qPCR en tiempo real con una sonda fluorescente específica para detectar secuencias del objetivo viral en extractos procedentes de muestras vegetales.
La inclusión de ambas abreviaturas en la documentación facilita la identificación del producto por parte de laboratorios, investigadores y profesionales que utilizan cualquiera de las dos denominaciones.
Características principales
- Detección cualitativa de Tomato fruit blotch virus.
- Identificación mediante las denominaciones ToFBV y ToBFV.
- Tecnología One-Step RT-qPCR.
- Retrotranscripción y amplificación integradas en un único programa.
- Detección mediante sonda fluorescente específica.
- Lectura de fluorescencia en el canal FAM.
- Reactivos específicos en formato liofilizado.
- Compatible con termocicladores qPCR de plataforma abierta.
- Adecuado para el análisis de extractos vegetales.
- Disponible en diferentes formatos de reacciones.
- Uso exclusivo para investigación.
Uso previsto
LoopSense™ Q ToFBV está destinado a la detección cualitativa de RNA de Tomato fruit blotch virus en extractos de muestras vegetales y en aquellas matrices que hayan sido verificadas por el laboratorio.
El producto puede integrarse en:
- Programas de investigación en virología vegetal.
- Análisis de plantas de tomate con síntomas compatibles.
- Evaluación de material vegetal aparentemente asintomático.
- Control de plantas madre y material de propagación.
- Estudios de presencia y distribución del virus.
- Programas internos de vigilancia de patógenos vegetales.
- Estudios de coinfección con otros virus del tomate.
Tipos de muestra
El ensayo está destinado al análisis de RNA previamente extraído de material vegetal.
Las matrices pueden incluir:
- Hojas.
- Brotes.
- Pecíolos.
- Cotiledones.
- Plántulas.
- Tejidos de plantas sintomáticas o aparentemente asintomáticas.
- Otros materiales vegetales previamente evaluados por el laboratorio.
El sistema de extracción de ácidos nucleicos no está incluido y debe seleccionarse de acuerdo con la matriz y el procedimiento utilizado.
Tecnología RT-qPCR
Tomato fruit blotch virus posee un genoma de RNA, por lo que el análisis requiere una etapa inicial de transcripción inversa.
LoopSense™ Q ToFBV combina en un único tubo:
- Retrotranscripción del RNA viral.
- Amplificación del ADN complementario.
- Detección específica mediante una sonda fluorescente.
La señal correspondiente al objetivo se registra en el canal FAM durante la fase de adquisición definida en el programa térmico.
Controles del ensayo
Cada ejecución debe incluir controles adecuados para verificar el funcionamiento correcto del análisis:
- Control positivo de amplificación.
- Control negativo de amplificación.
- Control negativo de extracción, cuando proceda.
- Control interno de extracción o amplificación, cuando se utilice.
- Muestras objeto de análisis.
La ejecución solamente debe considerarse válida cuando todos los controles cumplen los criterios de aceptación establecidos en el IFU y en los procedimientos internos del laboratorio.
Presentación del producto
LoopSense™ Q ToFBV se suministra con reactivos específicos liofilizados para la retrotranscripción, amplificación y detección del objetivo.
La configuración final, el número de determinaciones y los controles incluidos dependen de la presentación comercial seleccionada.
El formato liofilizado facilita la preparación de la reacción, reduce la manipulación de reactivos y contribuye a la estandarización del flujo de trabajo.
Compatibilidad
El ensayo puede utilizarse en termocicladores de PCR en tiempo real de plataforma abierta que cumplan los siguientes requisitos:
- Compatibilidad con el canal FAM.
- Posibilidad de programar una etapa de retrotranscripción.
- Adquisición de fluorescencia al final de la fase indicada en el IFU, habitualmente a 60 °C.
- Compatibilidad con el volumen de reacción establecido.
- Compatibilidad con el tipo de tubo, placa o consumible utilizado.
Interpretación de resultados
La presencia o ausencia del objetivo debe evaluarse mediante el análisis de las curvas de amplificación y la comparación con los controles del ensayo.
La interpretación debe considerar:
- La amplificación correcta del control positivo.
- La ausencia de señal específica en el control negativo.
- La forma y consistencia de la curva de amplificación.
- El valor de Cq obtenido para cada muestra.
- El comportamiento del control interno, cuando se utilice.
- Los criterios de aceptación definidos por el laboratorio y el IFU.
Un resultado debe considerarse válido únicamente cuando todos los controles cumplen los criterios establecidos.
Documentación técnica
Las instrucciones de uso —IFU— incluyen:
- Las condiciones de preparación de la reacción.
- El programa térmico recomendado.
- Los controles que deben incorporarse.
- Los canales de fluorescencia requeridos.
- Los criterios de aceptación e interpretación.
- Las recomendaciones de conservación y manipulación.
LoopSense™ Q ToFBV se comercializa exclusivamente para Research Use Only — RUO. No está destinado a diagnóstico clínico.
Documentación técnica
Consulta las instrucciones de uso para conocer la preparación de la reacción, el programa térmico, los controles y los criterios de interpretación.
Preguntas frecuentes
¿ToFBV y ToBFV hacen referencia al mismo objetivo?
En esta página se incluyen las abreviaturas ToFBV y ToBFV para facilitar la búsqueda e identificación del virus por parte de los usuarios que emplean cualquiera de las dos denominaciones.
¿El kit utiliza RT-qPCR?
Sí. El ensayo incorpora una etapa inicial de transcripción inversa para convertir el RNA viral en ADN complementario antes de la amplificación mediante PCR en tiempo real.
¿En qué canal se detecta la amplificación?
La señal fluorescente correspondiente al objetivo se registra en el canal FAM.
¿El kit incluye el sistema de extracción?
No. El RNA debe extraerse previamente mediante un procedimiento adecuado para la matriz vegetal analizada.
¿Puede utilizarse en cualquier termociclador?
Puede utilizarse en equipos qPCR de plataforma abierta compatibles con el canal FAM, el programa térmico, el volumen de reacción y el tipo de consumible indicados en las instrucciones de uso.
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